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    乳鐵蛋白（lactoferrin， LF）是一種分子量約為 80 kDa的鐵結合糖蛋白，具有鐵調節[^[2]]、免疫調節[^[3]]、促進骨生長[^[4]]、保護消化系統健康[^[5]]等生理活性，是乳及乳制品中重要營養指標之一，常被用作營養強化劑添加在嬰幼兒配方食品中。但部分嬰幼兒會對乳蛋白過敏，需要食用含水解蛋白的嬰配乳粉或特醫乳粉。此類產品中的水解蛋白和多肽會干擾乳鐵蛋白檢測，導致國標方法回收率不達標。

    行業反饋后，國家食品安全風險評估中心已明確現行的GB 5009.299-2024不適用于含有水解蛋白的嬰幼兒配方食品（其中包括特殊醫學用途嬰兒配方食品）[1]。

針對此問題，島津SGLC在國標基礎上開發了專用緩沖鹽提取包，適用于乳蛋白部分水解、深度水解及氨基酸配方等特醫嬰兒配方乳粉，配合SHIMSEN肝素親和柱，可保證良好的回收率與重現性。相關方案如下：

一：樣品前處理

采用專用提取鹽包(適用于水解嬰配粉，P/N：380-00930-10) + SHIMSEN 肝素親和柱(3mg/3mL, PN: 380-00930-02)進行樣品處理，實驗操作和緩沖鹽配置請按照完整版應用案例進行，步驟如下：

①專用提取液配制方法：提取緩沖鹽瓶內加入375ml水，溶解，加入8g體積分數為10%吐溫-20溶液，混勻，用磷酸調pH至6±0.2，用水定容至500ml；

②專用提取液的溫度不能超過50℃，否則乳鐵蛋白有失活的風險，致使回收率偏低，本實驗采用48℃水浴；

③離心完成后，立即移取10mL上清液到15mL離心管中備用，否則上層乳脂會逐漸再溶解到水溶液中，干擾后續的上柱以及上機分析；

④SHIMSEN 肝素親和柱包裝盒內自帶磷酸鹽緩沖鹽包Ⅰ和Ⅱ，使用前按要求溶解定容后即可用于活化；

⑤小柱及待凈化液在上樣前要恢復到室溫；過柱時建議控制流速，每秒1-2滴(批量過柱時可采用自重流出)，流速過快會導致回收率偏低；

⑥優先建議離心后直接上機分析，不通過針頭濾器，避免吸附損失；

⑦乳鐵蛋白容易被玻璃小瓶吸附，建議使用PP材質的低吸附小瓶(PN：380-00511)。

話題二：上機分析

2.1 分析條件

儀器：Shimadzu LC-20AD 高效液相色譜儀